ESTUDIO DE PERSISTORES EN BIOFILMS OBTENIDOS DE AISLAMIENTOS CLÍNICOS DE Burkholderia contaminans RECUPERADOS DE INFECCIONES CRÓNICAS DE PACIENTES CON FIBROSIS QUÍSTICA. EMPLEO DE NUEVOS AGENTES ANTIMICROBIANOS.

Estudios epidemiológicos realizados en nuestro laboratorio demostraron que B. contaminans es la especie del Complejo Burkholderia cepacia de mayor prevalencia entre los patógenos emergentes que colonizan las vías aéreas de pacientes con fibrosis quística (FQ) en nuestra región. Estos organismos pueden trasmitirse entre pacientes, son multi-resistentes y capaces de ocasionar neumonía necrotizante con reducción en la expectativa de vida del paciente. Recientemente hemos reportado que las infecciones causadas por B. contaminans derivan en procesos pulmonares crónicos que raramente pueden ser erradicados por tratamientos con antimicrobianos. En E. coli, P. aeruginosa, S. aureus, y B. cenocepacia, se demostró que una de las causas que impide la erradicación de la infección crónica, es el surgimiento de "persistores". Estos constituyen sub-poblaciones de células "durmientes" tolerantes a antimicrobianos que surgen en condiciones de stress, o ante exposiciones prolongadas a antimicrobianos. La tolerancia de los persitores no resulta de mutaciones genéticas que modifican la resistencia celular, sino que estas células constituyen una variante fenotípica sobre la cual la gran mayoría de los antibióticos, que requieren organismos metabólicamente activos, no pueden actuar. El objetivo general del presente plan es avanzar en la caracterización y control de persistores que surgen en biofilms de aislamientos clínicos de B. contaminans luego del tratamiento con altas dosis de antimicrobianos. Se estudiará la presencia, localización, características bioquímicas, fenotípicas y viabilidad de los persistores remanentes luego del tratamiento con 4XMIC de ciprofloxacina. Se analizará la eficiencia de la aplicación de nuevos agentes derivados de tiourea y guanidina -en trámite de patentamiento en CONICET- para disgregar biofilms y erradicar las subpoblaciones de persistores. Para tal fin se implementarán cultivos en biofilm con flujo continuo de nutrientes y técnicas microscópicas para estudios estructurales y físicos (microscopía de fluorescencia, escaneo láser confocal, electrónica de barrido, fuerza atómica) y micro-espectroscópicas para análisis localización, composición química y fenotipo (FTIR, microcopía Raman Confocal) sobre los biofims antes y después del tratamiento con elevadas dosis de antimicrobianos. Estos estudios tendrán como fin último sentar las bases para el desarrollo de nuevos enfoques para la erradicación de infecciones crónicas en pacientes con FQ

Eviction of a 125 GeV 'heavy'-Higgs from the MSSM

We prove that the present experimental constraints are already enough to rule out the possibility of the ~125 GeV Higgs found at LHC being the second lightest Higgs in a general MSSM context, even with explicit CP violation in the Higgs potential. Contrary to previous studies, we are able to eliminate this possibility analytically, using simple expressions for a relatively small number of observables. We show that the present LHC constraints on the diphoton signal strength, tau-tau production through Higgs and BR(B -> X_s gamma) are enough to preclude the possibility of H_2 being the observed Higgs with m_H~125 GeV within an MSSM context, without leaving room for finely tuned cancellations. As a by-product, we also comment on the difficulties of an MSSM interpretation of the excess in the gamma-gamma production cross section recently found at CMS that could correspond to a second Higgs resonance at m_H~136 GeV

The Pseudomonas aeruginosa biofilm matrix and cells are drastically impacted by gas discharge plasma treatment: A comprehensive model explaining plasma-mediated biofilm eradication

Biofilms are microbial communities encased in a protective matrix composed of exopolymeric substances including exopolysaccharides, proteins, lipids, and extracellular DNA. Biofilms cause undesirable effects such as biofouling, equipment damage, prostheses colonization, and disease. Biofilms are also more resilient than free-living cells to regular decontamination methods and therefore, alternative methods are needed to eradicate them. The use of non-thermal atmospheric pressure plasmas is a good alternative as plasmas contain reactive species, free radicals, and UV photons well-known for their decontamination potential against free microorganisms. Pseudomonas aeruginosa biofilms colonize catheters, indwelling devices, and prostheses. Plasma effects on cell viability have been previously documented for P. aeruginosa biofilms. Nonetheless, the effect of plasma on the biofilm matrix has received less attention and there is little evidence regarding the changes the matrix undergoes. The aim of this work was to study the effect plasma exerts mostly on the P. aeruginosa biofilm matrix and to expand the existing knowledge about its effect on sessile cells in order to achieve a better understanding of the mechanism/s underlying plasma-mediated biofilm inactivation. We report a reduction in the amount of the biofilm matrix, the loss of its tridimensional structure, and morphological changes in sessile cells at long exposure times. We show chemical and structural changes on the biofilm matrix (mostly on carbohydrates and eDNA) and cells (mostly on proteins and lipids) that are more profound with longer plasma exposure times. We also demonstrate the presence of lipid oxidation products confirming cell membrane lipid peroxidation as plasma exposure time increases. To our knowledge this is the first report providing detailed evidence of the variety of chemical and structural changes that occur mostly on the biofilm matrix and sessile cells as a consequence of the plasma treatment. Based on our results, we propose a comprehensive model explaining plasma-mediated biofilm inactivation.Fil: Soler Arango, Juliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; ArgentinaFil: Fígoli, Cecilia Beatríz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; ArgentinaFil: Muraca, Giuliana Sabrina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; ArgentinaFil: Bosch, María Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; ArgentinaFil: Brelles Mariño, Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales; Argentin

Identificación rápida de bacterias aisladas de pacientes fibroquísticos mediante espectroscopía infrarroja y análisis multivariante

A partir del año 2004 se ha registrado en el Hospital de Niños de La Plata, un aumento en el número de aislamientos de B. cepacia en pacientes fibroquísticos (FQ), así como también en niños con otras patologías. La identificación rápida y precisa de estas bacterias resulta esencial para la iniciación del tratamiento adecuado. Los métodos bioquímicos empleados de rutina para la identificación microbiológica, no brindan por lo general resultados certeros, demandan al menos 5 días de análisis y sólo permiten discriminar hasta el nivel de especie. Sin embargo, las bacterias identificadas como "B. cepacia" comprenden un grupo de 9 especies o genomovares altamente relacionados, denominado colectivamente el Complejo B. cepacia. El objetivo de este trabajo fue desarrollar una estrategia que permitiera la identificación y caracterización rápida de organismos aislados de muestras de esputo de pacientes FQ a nivel de subtipo de genomovar, basada en el empleo de espectroscopia infrarroja con transformada de Fourier (FTIR) combinada con técnicas de análisis multivariante. Se obtuvieron espectros de 14 aislamientos hospitalarios y 16 cepas de referencia previamente confirmadas por técnicas de biología molecular (PCR y corte con enzimas de restricción) en un espectrómetro Perkin Elmer (Spectrum One). Para ello se utilizaron colonias obtenidas en medio sólido en condiciones estandarizadas, proveniente de un cultivo confluente resuspendidas en H2O, transferidas a una celda de ZnSe y llevadas a sequedad hasta obtener un film homogéneo y transparente. Los espectros se normalizaron y sus derivadas primeras fueron sometidas a diferentes análisis multivariantes para su diferenciación y construcción de librerías espectrales. Se desarrollaron y compararon dos sistemas de caracterización, diferenciación e identificación basados en: 1) análisis de clusters (AC) empleando el coeficiente de Pearson y el algoritmo de Ward (software OPUS V.4.0, Bruker Optics, USA) y 2) un sistema de redes neuronales artificiales (ANNs) que discrimina en tres diferentes niveles (género, genomovar y subtipo), entrenado aplicando diferentes algoritmos (NeuroDeveloper© software, Germany). Se demostró que FT-IR combinada con AC y/o ANNs permite la identificación rápida (menos de 36 horas), precisa y a bajo costo de organismos de interés clínico.Ganador al premio Mejor Trabajo Científico de las Cuartas Jornadas de Actualización en Clínica Pediátrica 200

Analytical techniques for deoxynivalenol detection and quantification in wheat destined for the manufacture of commercial products

The concern regarding toxicity from the presence of deoxynivalenol (DON) in wheat that affects both economy and public health leads to the need to find appropriate detection methods for determining the degree of DON contamination in terms of the equipment available and the speed required for obtaining the incidence. The objective of this study was to compare the performance of two alternative analytical techniques for DON quantification for use in the food industry with a reference technique. Samples of wheat and the commercial by-products were analysed by high-performance liquid chromatography (HPLC) with an ultraviolet detector as the reference method and the results compared with those obtained from a rapid lateral-flow immunochromatographic device (Reveal Q+) and of a Fourier-transform-infrared (FTIR) spectroscopy technique. Pearson’s correlation coefficient between the HPLC and Reveal-Q+ data (0.45), although significant (P<0.0003), was lower than that obtained between HPLC and the FTIR method (0.94, P<0.0001). Both methods were considered efficient in quantifying DON levels in wheat-flour samples. This study was aimed at assisting the producers in choosing an appropriate tool for the purpose of analysis and upon consideration of the available equipment.Facultad de Ciencias ExactasCentro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriales (CINDEFI

Implementación de trabajos especiales en Ingeniería Bioquímica I

Ingeniería Bioquímica I es una materia obligatoria del cuarto Año de la Carrera de Ingeniería Química de la Facultad de Ingeniería de la UNLP. Esta es la primera asignatura de esta carrera donde se introduce al alumno en las posibilidades que ofrece la domesticación de organismos vivos. La materia tiene como objetivo preparar al alumno en un área multidisciplinaria como la Biotecnología, la cual combina conocimientos de física, química, biología, bioquímica, microbiología, genética, bioinformática e ingeniería. Esta disciplina emplea organismos vivos o parte de estos, para producir bienes y servicios integrando conocimientos de ciencia con tecnología. Si bien la asignatura está diagramada de manera que el alumno se lleve un conocimiento global de las etapas de un proceso biotecnológico, se describen procesos y se implementan trabajos prácticos a escala de laboratorio. Dada la imposibilidad práctica de realizar u observar procesos a escala industrial o de abarcar la diversidad de procesos biotecnológicos, se decidió implementar un conjunto de trabajos especiales, a través de los cuales se pudiera integrar y aplicar los conocimientos trasmitidos, para implementar y entender las aplicaciones biotecnológicas en pequeña y gran escala.Trabajo publicado en Giordano, Carlos José y Morandi, Glenda (comps.). Memorias de las 2º Jornadas sobre las Prácticas Docentes en la Universidad Pública. La enseñanza universitaria a 100 años de la reforma: legados, transformaciones y compromisos. Universidad Nacional de La Plata: La Plata, 2019.Presidenci

Implementación de trabajos especiales en Ingeniería Bioquímica I

Ingeniería Bioquímica I es una materia obligatoria del cuarto Año de la Carrera de Ingeniería Química de la Facultad de Ingeniería de la UNLP. Esta es la primera asignatura de esta carrera donde se introduce al alumno en las posibilidades que ofrece la domesticación de organismos vivos. La materia tiene como objetivo preparar al alumno en un área multidisciplinaria como la Biotecnología, la cual combina conocimientos de física, química, biología, bioquímica, microbiología, genética, bioinformática e ingeniería. Esta disciplina emplea organismos vivos o parte de estos, para producir bienes y servicios integrando conocimientos de ciencia con tecnología. Si bien la asignatura está diagramada de manera que el alumno se lleve un conocimiento global de las etapas de un proceso biotecnológico, se describen procesos y se implementan trabajos prácticos a escala de laboratorio. Dada la imposibilidad práctica de realizar u observar procesos a escala industrial o de abarcar la diversidad de procesos biotecnológicos, se decidió implementar un conjunto de trabajos especiales, a través de los cuales se pudiera integrar y aplicar los conocimientos trasmitidos, para implementar y entender las aplicaciones biotecnológicas en pequeña y gran escala.Trabajo publicado en Giordano, Carlos José y Morandi, Glenda (comps.). Memorias de las 2º Jornadas sobre las Prácticas Docentes en la Universidad Pública. La enseñanza universitaria a 100 años de la reforma: legados, transformaciones y compromisos. Universidad Nacional de La Plata: La Plata, 2019.Presidenci

Prólogo de los Editores Invitados del Número Especial COVID-19

Esta edición especial de la Revista de Innovación y Desarrollo Tecnológico y Social, tiene por finalidad presentar la diversidad de algunas de las líneas de acción llevadas adelante por la UNLP para contribuir a hacer frente a la presente pandemia. De esta forma se publican en este número 14 trabajos de investigación y desarrollo (I+D) llevados a cabo por distintos grupos en diferentes unidades académicas. Estos trabajos se desarrollaron por docentes, investigadores y alumnos en cada una de las Facultades de la UNLP gracias al apoyo de diferentes líneas de financiación provenientes del estado Provincial y Nacional, tales como el Ministerio de Salud de la Provincia de Buenos Aires y el Ministerio de Ciencia, Tecnología e Innovación Productiva de la Nación. Esta rápida y coordinada respuesta de nuestra Universidad frente a la crisis, fue impulsada desde el Rectorado y apoyada fuertemente por Decanos de las distintas Facultades. Las acciones llevadas a cabo han puesto de manifiesto que la modalidad convencional de I+D basada en grupos de trabajo aislados o dedicados al estudio de aspectos específicos puede ser re direccionada para generar un nuevo paradigma de I+D donde la experticia conjunta e interdisciplinaria puede dedicarse a la resolución de problemáticas complejas con inmediato impacto productivo y socio-cultural. En este sentido, la comunidad de la UNLP ha logrado definir con mayor claridad su función y responsabilidades en cada nivel de la organización, logrando mejorar la comunicación entre grupos de trabajo de una misma unidad académica y entre facultades, lo que ha permitido una interacción inédita hasta el presente.Secretaría de Ciencia y Técnic

Study of a bacterial consortium adapted to low bioavailability to phenanthrene, as potential inoculant to chronically PAH contaminated soils

Due to the reduced bioavailability that characterizes chronically hydrocarbons contaminated soils, the bioaugmentation with cultures obtained by enrichment in solid phase systems, could be a promissing strategy to apply in aged contaminated soils. In this context, the objective of this work was to study four bacterial component obtained from a degrader phenanthrene consortium by using solid phases with a resin XAD2 preloaded with phenanthrene, and to rebuild a defined degrading consortium from them. The isolated strains were identified by 16S rRNA and phenotypically characterized using the conventional assays. Furthermore, their main phenotypic features and biochemical characteristics where analyzed by Fourier-transform infrared spectroscopy (FT-IR). The phenanthrene degradation was studied from both in the strain pure cultures and from the defined consortium. Our results showed that the application of XAD2 preloaded with phenanthrene culture systems represents a selective environment towards substrate colonizing bacterial species and allow us study the different strategies to enhance the PAH uptake and allow the bacterial survival in oligotrophic conditions

Characterization of <i>Fusarium graminearum</i> isolates recovered from wheat samples from Argentina by Fourier transform infrared spectroscopy: phenotypic diversity and detection of specific markers of aggressiveness

Fusarium graminearum is the primary causal agent of Fusarium head blight of wheat in Argentina. This disease affects crop yields and grain quality also reducing the wheat end-use, and causing mycotoxin contamination. The aim of this work was to analyze the phenotypic characteristics associated with phenotypic diversity and aggressiveness of 34 F. graminearum sensu stricto isolates recovered from Argentinean fields in the 2008 growing season using the Fourier Transform Infrared (FTIR) dried film technology. We applied this technique also to search for spectral specific markers associatedwith aggressiveness. The combination of FTIR technologywith hierarchical cluster analysis allowed us to determine that this population constitutes a highly diverse and heterogeneous group of fungi with significant phenotypic variance. Still, when the spectral features of a set of these isolates were compared against their aggressiveness, as measured by disease severity, thousand grains weight, and relative yield reduction, we found that the more aggressive isolates were richer in lipid content. Therefore, we could define several spectroscopic markers (> C — H stretching modes in the 3000–2800 window, > C=O and — C — O vibrational modes of esters at 1765–1707 cm−1 and 1474–900 cm−1, respectively),, mostly assigned to lipid content that could be associated with F. graminearum aggressiveness. All together, by the application of FTIR techniques and simple multivariate analyses, it was possible to gain significant insights into the phenotypic characterization of F. graminearum local isolates, and to establish the existence of a direct relationship between lipid content and fungal aggressiveness. Considering that lipids have a major role as mediators in the interaction between plants and fungi our results could represent an attractive outcome in the study of Fusarium pathogenesis.Centro de Investigación y Desarrollo en Fermentaciones Industriale